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lb培养基(lb固体培养基配方是什么?)

1、lb固体培养基配方是什么?1、配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉。2、抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55...

1、lb固体培养基配方是什么?

1、配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉。

2、抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。

3、倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。

4、保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。

注意事项:

玻璃器皿等在灭菌前必须经正确包裹和加塞,以保证玻璃器皿于灭菌后不被外界杂菌所污染。

将包扎好的物品放入干燥烘箱内,注意不要摆放太密,以免妨碍空气流通,不得使器皿与烘箱的内层底板直接接触。将烘箱的温度升至160-170℃并恒温1-2h,注意勿使温度过高,超过170℃,器皿外包裹的纸张、棉花会被烤焦燃烧。

如果是为了烤干玻璃器皿,温度为120℃持续30分钟即可。温度降至60-70℃时方可打开箱门,取出物品,否则玻璃器皿会因骤冷而爆裂。

来源:百度百科-LB固体培养基

lb培养基(lb固体培养基配方是什么?)

2、LA培养基与LB培养基区别?

1、成分的不同:

LA是LB培养基里加入了氨苄青霉素,所以LA培养基比LB培养基多了一种氨苄青霉素原料。

2、应用的对象不同:

由于LB多了一种原料,其中氨苄青霉素的浓度根据的质粒是松弛型还是严谨型来加的。

培养基供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。

1、液体培养基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。

2、固体培养基:一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。

3、半固体培养基:在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。

4、脱水培养基:又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。

5、选择性培养基:一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。

6、鉴别培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。

来源:百度百科-培养基

lb培养基(lb固体培养基配方是什么?)

3、LB培养基如何配制

以配制一升培养基为例:

应该在950 ml去离子水中加入:

胰蛋白胨10g

酵母提取物5g

NaCl 10g

摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0,用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌21min。

配置原则:

1、选择适宜的营养物质

就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培养它们所需的培养基各不相同。

在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏I号合成培养基培养放线菌,培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,培养霉菌则一般用查氏合成培养基。

2、营养物质浓度及配比合适

培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。

另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。

3、控制pH条件

培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。

值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。

4、控制氧化还原电位(redox potential)

不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3一+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。

5、原料来源的选择

在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。

6、灭菌处理

要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。

在配制培养基过程中,泡沫的存在对灭菌处理极不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。

:百度百科-LB培养基

4、PH6.1的LB液体培养基的配制

1.称量:准确称取各成分。蛋白胨0.5g,酵母提取物0.25g,氯化钠0.5g,加水50ml。配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。

2.溶化:加热熔化,用蒸馏水定容到50mL。配置LB固体培养基时还需加琼脂,整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

3.调pH:将pH调至6.1。

4.灭菌:在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基,加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好,放入灭菌锅内,1kg压力灭菌15min。

5.倒平板:灭菌后,待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁,右手拿装有培养基的三角瓶,左手拔出棉塞;

②右手拿三角瓶,使三角瓶的瓶口迅速通过火焰;

③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖;

④待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。

倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。向培养皿中转移已灭菌的培养基时,也不要把培养基沾在皿壁上。否则,空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖,并污染皿内培养基。

5、lb培养基全称

什么是LB培养基?

LB培养基是一种最为广泛应用的细菌营养培养基,是由Luria和Bertani在20世纪50年代初开发的。该培养基主要用于在细菌学及相关领域中进行微生物的培养和保存。LB培养基中含有丰富的营养成分,可以使许多细菌获得足够的营养、生长和繁殖。

LB培养基的成分

LB培养基的主要成分包括三种:牛肉提取物、酵母提取物和纤维素。牛肉提取物和酵母提取物为LB培养基提供了大量的氨基酸、蛋白质、碳水化合物和核酸等营养成分。而纤维素则是为了保持LB培养基的pH值和缓冲氧化还原状态。

LB培养基的优点

LB培养基具有许多优点,使其成为微生物学实验中最为广泛使用的培养基之一。首先,LB培养基中的营养成分非常丰富,可以更好地满足细菌生长所需的营养要求。此外,LB培养基的制备方法简单,使用方便,不需要复杂的操作,且不需要使用昂贵的培养基配制组分,成本低廉。

LB培养基的应用

LB培养基在微生物学实验中有着广泛的应用,可以用于细菌的普遍培养和生长、酵母和真菌等微生物的培养及大肠杆菌的表达载体构建和重组蛋白表达等方面。此外,还可以用于细菌药敏试验的筛选、分离和鉴定,还可以用于质粒DNA的纯化等实验。

LB培养基的保存方法

用过的LB培养基可以保存在室温下,但要防止阳光直射和受潮。长期储存应存放在冷藏箱中,但要注意避免其冻结。为了避免培养基受污染,建议在保存培养基之前将其过滤。

LB培养基的注意事项

在制备LB培养基时,必须严格按照配方比例和方法进行,遵循好实验室规范。使用前应先检查培养基有没有结块、褐变或者发臭等现象,如果发现异常应及时更换。此外,在使用LB培养基时,应注意避免污染和交叉感染。

综上所述,LB培养基由于其高度丰富和广泛适用性,成为微生物学研究中最为常用的培养基之一。通过了解其成分、优点以及使用方法,可以更好地应用该培养基进行生物学实验和微生物学研究。

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